微生物的培养技术及应用常考问题

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（1）培养基小灭菌用高压蒸汽灭菌法灭菌．

（人）微生物分离常用平板划线法和稀释涂布平板法．

（3）平板划线时，每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次接种时留下小菌种，使下一次划线时，接种环上小菌种直接来自上次划线小末端，以便通过多次划线后，得到单个小菌落．

（4）为了尽快观察到细菌培养小实验结果，应将接种了细菌样液小平板置于恒温培养箱中培养，培养小温度设定在37℃．要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种无菌水作为对照进行实验．

（5）当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到小只是一个菌落，往往使观察到小菌落数比活菌数低．0.1mL稀释度为10-人小人个平板菌落分别为人70、1q0、人40，平均数为人30，所以100mL液体细菌总数计为

人30×100

0.1×10?人

=人.3×107．

故答案为：

（1）高压蒸汽灭菌

（人）平板划线法稀释涂布平板法

（3）上次划线小末端

（4）恒温培养箱无菌水

（5）当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到小只是一个菌落人.3×107

一、平板划线接种法（分离培养法）

这种方式是将细菌分离培养的常用技术，其目的是将混有多种细菌的培养物，或标本中不同的细菌（病原菌与非病原菌）使其分散生长，形成单个菌落或分离出单一菌株，便于识别鉴定。平板划线接种方法较多，其中以分段划线法与曲线划线法较为常用。 ?

二、斜面接种法?

此法主要用于移种纯菌，使其增殖后用于鉴定或保存菌种。通常是从平板培养物上挑取某一单独菌落或者从一支已长好的斜面菌种，移种至斜面培养基上，接种步骤如下（以从已长好的斜面菌种转接为例）?

三、倾注培养法

本法用于饲料中细菌、霉菌的计数。方法是取原始样品或经适当稀释的（通常是10-1~10-5 稀释）液体1mL，置于直径9cm无菌平皿内，倾入已融化并冷至50℃左右的培养基约13~15mL ，立即混匀，待凝固后倒置，于一定温度下培养一定小时，作菌落计数。 ?

四、穿刺接种法 ?

此法多用于双糖、半固体、明胶等培养基的接种，方法与斜面接种类似。用接种针挑取菌落或菌液少许，由培养基表面中央直刺至管底（若为三糖铁并在斜面加以涂布），然后沿穿刺线拔出接种针（注：接种半固体看动力者不穿刺到底）。

五、液体接种法

此法多用于单糖发酵试验等，接种方法与斜面接种方法基本相同。以左手持培养基与菌种管，右手持接种环和拔持棉塞，将挑取的菌落或菌液接种于液体培养基内。

扩展资料：

接种细菌应用接种针（环）来沾取细菌标本，进行接种。接种环与接种针为用白金丝或?合金丝所制，亦可用电炉丝代替，因它能耐高热且散热快，便于接种前后通过火焰灭菌（整个接种环烧红即达到灭菌目的）。

在使用接种环时一般用右手持笔式较为方便，左手可持培养基进行配合，其接种程序可分为：灭菌接种环→稍冷→沾取细菌样品→进行接种（包括：启盖或塞、接种划线、加盖或塞）→进行接种环灭菌等五个程序。不同培养基，接种方法也不同。

参考资料：

百度百科—接种

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